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合肥巔峰生物專業(yè)研發(fā)生產(chǎn)蛋白酶K

發(fā)表時(shí)間:2016-04-01 瀏覽次數(shù):3056  【關(guān)閉

合肥巔峰生物科技有限公司是一家集生物科技產(chǎn)品的科研、銷售于一體的民營(yíng)科技企業(yè)。公司注冊(cè)于合肥經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū),與國(guó)內(nèi)知名大學(xué)等高校深度合作。巔峰生物有著一支極富熱情、經(jīng)驗(yàn)豐富的管理、研發(fā)和銷售隊(duì)伍。研發(fā)小組的技術(shù)人員有教授2名、博士生1名,研究生6名,本科生6名。

目前公司的主要產(chǎn)品是蛋白酶K、ATP熒光檢測(cè)儀、生物試劑、食品安全檢測(cè)儀器以及耗材等。本公司的ATP熒光檢測(cè)儀,已完全投放市場(chǎng),并得到了客戶的一致好評(píng)。巔峰生物公司生產(chǎn)的蛋白酶K(專利號(hào):201410472748.1)在尿素和SDS中具有降解天然蛋白質(zhì)的能力,因而被廣泛應(yīng)用于制備脈沖電泳的染色體DNA、蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。保存方式不僅可以在凍干粉狀態(tài)下保持酶活一年,而且在溶液狀態(tài)下亦可保持酶活一年以上。

    公司秉承:誠(chéng)信、品質(zhì)、服務(wù)的經(jīng)營(yíng)理念,對(duì)客戶誠(chéng)信負(fù)責(zé),對(duì)工作精益求精、對(duì)伙伴協(xié)作共享。堅(jiān)持:高效、務(wù)實(shí)、學(xué)習(xí)、創(chuàng)新的企業(yè)精神;倡導(dǎo):忠誠(chéng)、勤奮、合作、能力的人才理念。

   

(一)、產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,從布氏白僵菌(Beauveria bassiana)中純化得到,用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。該酶有兩個(gè)ca2+結(jié)合位點(diǎn),它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機(jī)理并無(wú)直接關(guān)系。然而,如果從該酶中除去ca2+,由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性,在尿素和SDS中也較為穩(wěn)定,還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力。

規(guī)格:100毫克普通裝或客戶定制

比活性值:38 U/mg蛋白

來(lái)源種屬:酵母菌

分子質(zhì)量:28,650

(二)、產(chǎn)品檢測(cè)報(bào)告

1、稀釋緩沖液

根據(jù)需要,利用20mM Tris-HCL 緩沖液(PH 7.5)溶解成20mg/ml的工作濃度。

2、質(zhì)量說(shuō)明

活性單位定義

37℃、PH7.5條件下,每分鐘可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量,定義為一個(gè)單位。

脫氧核糖核酸酶殘留

以λDNA為底物,37℃消化4小時(shí)以上,未檢測(cè)到脫氧核糖核酸酶活性。

核糖核酸酶殘留

37℃消化12小時(shí)以上,未檢測(cè)到核糖核酸酶活性。

3、酶純度測(cè)定(SDS—PAGE)

結(jié)果:蛋白酶K純度超過(guò)99.2%。

4、酶活性測(cè)定

蛋白酶K比活性值

產(chǎn)品來(lái)源

本產(chǎn)品

西格瑪

比活性值(U/mg)

38

>30

5、酶穩(wěn)定性測(cè)定(—20℃冷凍條件下,12個(gè)月的數(shù)據(jù))

結(jié)果:干粉狀態(tài)正確儲(chǔ)存,一年內(nèi)酶活性保持不變;溶解狀態(tài)酶活性一年內(nèi)降低小于2%。

6、酶質(zhì)檢結(jié)果

序號(hào)

檢驗(yàn)項(xiàng)目

檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

是否合格(合格√)

 

1

動(dòng)物基因組提取(蛋白酶K濃度為20mg/ml)

不影響動(dòng)物基因組的有效提取

與不加蛋白酶K的樣品相比,能有效降解蛋白質(zhì)

2

降解蛋白質(zhì)能力

與15ug BSA 37℃孵育1小時(shí),BSA可有效降解

質(zhì)檢結(jié)論:合格(√) 讓步放行( ) 需要復(fù)檢( ) 不合格( )

(三)、抑制劑

蛋白酶K是一種絲氨酸蛋白酶,因此可以用苯甲基磺酰氟抑制其作用,苯甲基磺酰氟是一種絲氨酸蛋白酶的抑制劑。在純化蛋白質(zhì)時(shí)用于防止蛋白質(zhì)的降解。

(四)、應(yīng)用范圍

蛋白酶K的用途廣泛,主要的應(yīng)用行業(yè)包括:醫(yī)療及基礎(chǔ)研究領(lǐng)域:基因診斷試劑盒;基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中去除DNA和RNA制備中的核酸酶;此外,還應(yīng)用于:皮革工業(yè)(皮革軟化及精細(xì)化、脫毛和軟化、蠶絲脫膠)制備脈沖電泳的染色體DNA;提取組織中非蛋白成分時(shí),降解含有蛋白質(zhì)雜質(zhì);食品、釀造工業(yè):肉類嫩化、酒類澄清;洗滌工業(yè):酶洗衣粉、洗衣液等也有應(yīng)用。

(五)、貯存和使用

干粉條件下有效期為24個(gè)月,液態(tài)時(shí)—20℃保存12個(gè)月??蛻衾镁彌_液溶解后,需要—20℃貯存。溶解后,最好分裝成若干份,方便使用,避免反復(fù)凍溶。如果需要在2-8℃環(huán)境下放置,超過(guò)三天,建議過(guò)濾除菌或加入抑菌劑如3%疊氮化鈉,防止微生物污染。

孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí);理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。

巔峰生物生產(chǎn)的蛋白酶K,是一種來(lái)源于新發(fā)現(xiàn)的真菌蛋白酶K基因,經(jīng)優(yōu)化后異源重組表達(dá)得到的切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于該蛋白酶K在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質(zhì)的能力,因而被廣泛應(yīng)用于制備脈沖電泳的染色體DNA、蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。

嚴(yán)格的對(duì)比實(shí)驗(yàn)研究表明,本公司產(chǎn)品蛋白酶K與現(xiàn)有市場(chǎng)上林伯氏白色念球菌來(lái)源的蛋白酶K產(chǎn)品相比,對(duì)大片段蛋白質(zhì)的切割能力基本相同,而在小片段蛋白質(zhì)的降解能力方面較其他產(chǎn)品活力高出50%以上。

通過(guò)工藝優(yōu)化及單因素實(shí)驗(yàn)分析,優(yōu)化調(diào)整培養(yǎng)基配方;采用先進(jìn)的節(jié)能設(shè)備,降低能耗、降低生產(chǎn)成本。

與中國(guó)科技大學(xué)緊密合作,研發(fā)構(gòu)建可表達(dá)高活性蛋白酶K 的布氏白疆菌,并申請(qǐng)發(fā)明專利進(jìn)入實(shí)審期。

由于蛋白酶K優(yōu)良的蛋白水解能力和特性,除了在生物科學(xué)研究方面,其在食品加工、飼料生產(chǎn)、環(huán)境保護(hù)、醫(yī)藥工業(yè)、能源和資源開(kāi)發(fā)等各個(gè)領(lǐng)域都有快速增加的需求。蛋白酶K 的廣泛應(yīng)用范圍讓我們看到了未來(lái)市場(chǎng)對(duì)蛋白酶K 的迫切需求,因此,在生物醫(yī)藥等市場(chǎng)迫切需求和發(fā)展趨勢(shì)的前提下,結(jié)合自身資源配置能力,巔峰未來(lái)的發(fā)展,一是繼續(xù)研究蛋白酶K的分子結(jié)構(gòu)與功能的相互關(guān)系,采用多種高通量技術(shù)進(jìn)化分子結(jié)構(gòu),進(jìn)一步提高酶催化特性;另一方面,提高蛋白酶K的重組表達(dá)技術(shù),大幅度提高生產(chǎn)水平和降低生產(chǎn)成本,滿足該重要酶在食品和飼料加工過(guò)程中的不斷增加的迫切需求。

 中國(guó)市場(chǎng)表現(xiàn)與西方市場(chǎng)有較大差異,除淀粉糖化酶、堿性蛋白酶外,其他酶種目前消費(fèi)很少,但隨著酶工程技術(shù)的研究開(kāi)發(fā),燃料乙醇、生物柴油等生物能源、生物環(huán)保、生物制造等領(lǐng)域,酶制劑有著廣泛的應(yīng)用。國(guó)民經(jīng)濟(jì)中占據(jù)重要地位但原料和能源消耗大、環(huán)境污染嚴(yán)重的造紙、紡織、制藥、飼料等行業(yè),酶制劑的應(yīng)用也在擴(kuò)大,未來(lái)市場(chǎng)前景一片大好。

 酶制劑產(chǎn)品定位——讓巔峰酶制劑成為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)的高端產(chǎn)品,未來(lái)在成功開(kāi)發(fā)蛋白酶K的基礎(chǔ)上,充分發(fā)揮校企聯(lián)合的優(yōu)勢(shì),開(kāi)發(fā)系列酶產(chǎn)品。在未來(lái)3-5年,占據(jù)市場(chǎng)份額50%以上。

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