合肥巔峰生物蛋白酶K
重組蛋白酶K質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告及使用說(shuō)明
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類(lèi)的高活性蛋白酶,從林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中純化得到,用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。該酶有兩個(gè)ca2+結(jié)合位點(diǎn),它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機(jī)理并無(wú)直接關(guān)系。然而,如果從該酶中除去ca2+,由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性,在尿素和SDS中也較為穩(wěn)定,還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力。
蛋白酶K的用途廣泛,主要的應(yīng)用行業(yè)包括:醫(yī)療及基礎(chǔ)研究領(lǐng)域:基因診斷試劑盒;基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中去除DNA和RNA制備中的核酸酶;此外,還應(yīng)用于:皮革工業(yè)(皮革軟化及精細(xì)化、脫毛和軟化、蠶絲脫膠)制備脈沖電泳的染色體DNA;提取組織中非蛋白成分時(shí),降解含有蛋白質(zhì)雜質(zhì);食品、釀造工業(yè):肉類(lèi)嫩化、酒類(lèi)澄清;洗滌工業(yè):酶洗衣粉、洗衣液等也有應(yīng)用。
規(guī)格:100毫克普通裝或客戶(hù)定制
比活性值:38 U/mg蛋白
來(lái)源種屬:酵母菌
分子質(zhì)量:28,650
貯存和使用
干粉條件下有效期為24個(gè)月,液態(tài)時(shí)—20℃保存12個(gè)月??蛻?hù)利用緩沖液溶解后,需要—20℃貯存。溶解后,最好分裝成若干份,方便使用,避免反復(fù)凍溶。如果需要在2-8℃環(huán)境下放置,超過(guò)三天,建議過(guò)濾除菌或加入抑菌劑如3%疊氮化鈉,防止微生物污染。
稀釋緩沖液
根據(jù)需要,利用20mM Tris-HCL 緩沖液(PH 7.5)溶解成20mg/ml的工作濃度。
質(zhì)量說(shuō)明
活性單位定義 |
37℃、PH7.5條件下,每分鐘可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量,定義為一個(gè)單位。 |
脫氧核糖核酸酶殘留 |
以λDNA為底物,37℃消化4小時(shí)以上,未檢測(cè)到脫氧核糖核酸酶活性。
|
核糖核酸酶殘留 |
37℃消化12小時(shí)以上,未檢測(cè)到核糖核酸酶活性。 |
酶純度測(cè)定(SDS—PAGE)
結(jié)果:蛋白酶K純度超過(guò)99.2%(掃描SDS—PAGE膠)。
酶活性測(cè)定
蛋白酶K比活性值 |
||
產(chǎn)品來(lái)源 |
本產(chǎn)品 |
Sigma |
比活性值(U/mg) |
38 |
>30 |
酶穩(wěn)定性測(cè)定(—20℃冷凍條件下,12個(gè)月的數(shù)據(jù))
結(jié)果:干粉狀態(tài)正確儲(chǔ)存,一年內(nèi)酶活性保持不變;溶解狀態(tài)酶活性一年內(nèi)降低小于2%。
酶質(zhì)檢結(jié)果(來(lái)自于某大型生物技術(shù)有限公司)
序號(hào) |
檢驗(yàn)項(xiàng)目 |
檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) |
是否合格(合格√) |
1 |
動(dòng)物基因組提取(蛋白酶K濃度為20mg/ml) |
不影響動(dòng)物基因組的有效提取 |
√ |
與不加蛋白酶K的樣品相比,能有效降解蛋白質(zhì) |
√ |
||
2 |
降解蛋白質(zhì)能力 |
與15ugBSA37℃孵育1小時(shí),BSA可有效降解 |
√ |
質(zhì)檢結(jié)論:合格(√) 讓步放行( ) 需要復(fù)檢( ) 不合格( ) |
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